应用双重PCR方法检测羊支原体肺炎病原
通过对丝状支原体山羊亚种(M. mycoides subsp.capri,Mmc)特异性引物MmcF/MmcR和绵羊肺炎支原体(M.ovipneumoniae,Mo)特异性引物LmF/LmR退火温度、引物浓度比例等条件的选择,建立了一个可以同时检测Mmc和Mo的双重PCR方法.该方法可同时扩增出Mmc 195 bp和Mo 361 bp目的片段,但对其他病原菌不能扩增出任何条带,具有良好的特异性.敏感性试验表明.该方法能够分别检测出0.1 ng的Mmc DNA和0.01 ng的Mo DNA,或同时检测出1 ng Mmc和1 ng Mo混合的DNA.用该双重PCR方法可对实验室保存的4株绵羊肺炎支原体和2株丝状支原体山羊亚种进行准确鉴定,并可从临床病料中检测出相应支原体,表明建立的双重PCR方法可用于Mine和Mo的快速鉴定、实验室诊断和病原学调查.
丝状支原体山羊亚种、绵羊肺炎支原体、双重PER、检测
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S852.62(动物医学(兽医学))
甘肃省农业生物技术专项GNSW-2005-16;甘肃省重大科技专项0702NKDA040;国家科技基础性工作专项2008FY210200
2010-02-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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