基因4型HEV上海株ORF2编码蛋白表达及其抗原性分析
为了表达基因4型戊型肝炎病毒(HEV)上海株ORF2编码蛋白并分析其抗原性,采用套式RT-PCR方法扩增上海猪基因4型HEV代表株结构蛋白基因ORF2部分片段,构建含有该基因片段的pET30a(+)重组表达质粒.命名为pET-E;将重组表达质粒转化大肠杆菌B121,经1mmol/L IPTG诱导得到表达,进行SDS-PAGE分析,然后用Western blot鉴定其抗原性,最后纯化蛋白.结果:SDS-PAGE证明该片段得到融合表达,分子量为33 ku.Western blot分析表明,重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性;该融合蛋白含有组氨酸标签,可以用MagExtractor-His-tag-kit进行纯化.用纯化的重组蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA检测89份猪血清样品,阳性率达80.4%,与已有的试剂盒检测结果相比,阳性符合率达95%.
戊型肝炎病毒、ORF2、重组质粒、原核表达
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S858.28(动物医学（兽医学）)
上海市科委登山行动计划重点项目063919121
2008-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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