鸡白介素8的克隆表达及其生物趋化性研究

摘要：

鸡白介素8(cIL8)是9E3/CEF4基因编码的一种诱导型趋化因子.用RT-PCR方法,从鸡胚胚体总RNA模板中扩增cIL8的cDNA序列,测序后,将cIL8基因分别克隆人pGEX-6p-1载体和pFastBacI载体进行表达.利用SDS电泳分离原核表达的cIL8融合蛋白,制备鼠抗cIL8血清,并与昆虫细胞表达的cIL8进行免疫荧光(IFA)反应,同时对雏鸡外周血单个核细胞(PBMC)进行生物趋化试验.结果成功扩增了cIL8基因的cDNA序列,在大肠杆菌和昆虫细胞中均能表达,制备的鼠抗cIL8血清能与昆虫细胞表达的cIL8反应.重组cIL8在一定浓度范围内,可使PBMC发生趋化作用,最高趋化指数为4.38±0.49,且是典型剂量依赖的钟形趋化性反应曲线.本研究结果为cIL8的功能研究和探讨马立克氏病病毒类白介素8(vIL8)的生物学作用奠定了基础.

关键词：cIL8、克隆、表达、抗体、趋化

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分类号：S831(家禽)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30270982;高等学校全圉优秀博士学位论文作者专项基金项目200256

在线出版日期：2008-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：9-14