10.3969/j.issn.0529-5130.2006.04.003
不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究
用3对分别针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7、ORF5和ORF5的PCR引物N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2进行RT-PCR,检测PRRSV,从其敏感性、特异性和临床样品检出率等方面进行比较,在此基础上进一步建立一步法RT-PCR检测方法.结果显示:3对引物对PRRSV均有很高的特异性;应用N1/N2引物病毒最低检测量为7.9 TCID50,而AdGP5.1/AdGP5.2引物和RFLP5.1/RFLP5.2引物PCR最低检测量为79 TCID50;运用N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物分别进行RT-PCR扩增检测临床样品,PRRSV检出率分别为28/48、27/48和25/48,且用AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物检测的阳性样品,用N1/N2引物检测也都呈阳性.运用N1/N2引物,通过一步法RT-PCR成功地从PRRSV S1株中扩增出374 bp的目的基因片段.结果表明,用N1/N2引物扩增PRRSV目的基因,其敏感性和临床样品检出率更高,更适合临床样品PRRSV的检测.
猪繁殖与呼吸综合征病毒、RT-PCR、一步法RT-PCR、不同引物
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S858(动物医学(兽医学))
中国科学院资助项目B0270990;中南大学校科研和教改项目20030307012;教育部优秀青年教师资助计划;教育部科学技术研究项目104101;浙江省科技攻关项目021102529
2006-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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