猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用

摘要：

本研究旨在建立一种快速、高效、灵敏的猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重鉴别荧光定量PCR检测方法,针对CSFV E2基因和BVDV 5'UTR基因序列的高度保守区域设计特异性引物和探针,经过反应条件及体系的优化,建立双重RT-qPCR方法.结果表明,该方法最低检测值均为5 copies·μL-1,比普通PCR灵敏约200倍,敏感性高;可准确区分CSFV和BVDV,且与口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒等猪常见病原均无交叉反应,特异性强;组内和组间重复变异系数均小于2%,重复性良好.对109份临床样品及7份商品化牛血清分别采用构建的双重RT-qPCR检测方法及CSFV RT-qPCR检测方法(GB/T 27540-2011)和BVDV RT-qPCR检测方法(GB/T 18637-2018)进行检测和对比,符合率为100%,同时,检测结果还证实目前商品化牛血清中仍存在BVDV污染,为CSFV、BVDV的鉴别诊断及流行病学的调查提供了技术支持.

关键词：猪瘟病毒、牛流行性腹泻病毒、双重荧光定量PCR

所属期刊栏目：54

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2022YFD1800601-4

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4422-4427