基于GNS蛋白的牛流行热病毒感染与免疫鉴别诊断ELISA方法的建立

摘要：

旨在建立牛流行热病毒(BEFV)感染与疫苗免疫的抗体ELISA诊断方法.在证实BEFV GNS 截短体与BEFV感染血清特异性反应的基础上,利用原核表达系统表达纯化GNS 全长蛋白并以其作为包被抗原,优化反应条件,建立基于BEFV GNS的鉴别病毒感染与疫苗免疫的BEFV间接ELISA方法.结果显示:在大肠杆菌中成功表达GNS蛋白,主要以包涵体的形式存在,纯化获得73 ku的重组蛋白.Western blot结果显示,纯化后的重组蛋白与BEFV感染牛血清反应原性良好,且与 BEF疫苗免疫牛血清未见反应.GNS 抗原最佳包被浓度为0.50 μg·mL-1,血清最佳稀释度为1∶20,酶标二抗最佳稀释度为1∶4 000,阴阳性临界值为S/P值0.206 9.该方法与BVDV、FMDV以及IBRV阳性血清无交叉反应,特异性良好;批内和批间变异系数均小于10%,重复性良好,可用于BEFV感染与疫苗免疫牛的鉴别诊断.

关键词：牛流行热、牛流行热病毒、牛流行热灭活疫苗、GNS蛋白、鉴别诊断ELISA

所属期刊栏目：54

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：甘肃省重点研发计划;甘肃省创新引导计划;兰州市科技计划项目;国家重点研发计划;甘肃省基础研究创新群体项目;国家肉牛牦牛产业技术体系项目;国家肉牛牦牛产业技术体系项目;农业科技创新工程

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4320-4326