基于串联亲和层析法纯化并鉴定猪初乳中SIgA

摘要：

分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是黏膜免疫的主要效应分子,在临床上常常作为疾病早期诊断的靶标,此外,基于SIgA的治疗性单抗和靶向SIgA产生的黏膜疫苗也越来越受到关注.分离并纯化出完整且具有活性的SIgA是产品研发的前提.为了提高猪初乳中SIgA的纯化效率,本研究采用串联亲和层析,强阴离子柱和精细分子筛层析进行纯化,从10 mL初乳中获得3 mg具有活性的SIgA.使用Western blot对纯化的SIgA进行鉴定,结果表明,纯化的SIgA与抗猪的重链蛋白单抗和抗SC单抗均具有良好的反应性.使用ELISA测试SIgA与抗猪的IgA重链单抗的反应性,结果发现使用本方法纯化的SIgA较原先方法(即硫酸铵沉淀,DEAE52弱阴离子层析,Sepha-dexG-200凝胶层析和多次亲和层析的纯化方法)具有更高的反应性.最后使用质谱鉴定纯化的蛋白,结果表明为猪的SIgA.本研究为从猪初乳中纯化SIgA建立了一种高效的纯化方法,也为其它来源的SIgA的纯化提供参考.

关键词：猪初乳、SIgA、纯化、鉴定

所属期刊栏目：54

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;江苏省农业科技自主创新资金项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：3884-3894