SYNGR2影响猪圆环病毒2型体外增殖的研究

摘要：

宿主的Synaptogyrin-2(SYNGR2)蛋白影响猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的感染能力.本研究旨在研究宿主因子SYNGR2对PCV2在细胞水平增殖的影响,并进一步对SYNGR2影响PCV2体外增殖的机制进行探究.本研究利用基因敲除、过表达、定点突变等手段,在PK15细胞上研究SYNGR2基因敲除及其p.Arg63Cys点突变对PCV2增殖的影响.为探究SYNGR2参与PCV2感染的具体机制,作者对SYNGR2基因敲除的细胞及野生型对照细胞进行转录组测序,筛选SYNGR2功能相关的基因及通路,根据差异表达基因进行表达模式聚类分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)验证差异表达基因的表达情况.结果显示,SYNGR2基因敲除或p.Arg63Cys点突变显著降低PCV2对PK15细胞的感染能力,对敲除细胞过表达不同基因型的SYNGR2,PCV2的增殖能力均恢复.转录组差异表达基因分析结果显示,SYNGR2的功能主要是参与膜成分及囊泡等被膜细胞器的组成.对差异表达基因肌球蛋白VⅡA与Rab互作蛋白(myosin ⅦA and Rab interac-ting protein,MYRIP)及其结合的外泌体调控相关基因Ras相关蛋白27(Ras-related protein-27,RAB27)进行qPCR检测,定量结果显示,RAB27 mRNA表达量在SYNGR2敲除后显著提升.本研究在细胞水平证实了 SYNGR2参与PCV2的体外增殖,SYNGR2基因敲除显著降低PCV2在PK15上的增殖能力,同时SYNGR2第63位氨基酸位点由Arg突变为Cys也显著降低PCV2在PK15上的增殖能力.转录组分析揭示SYNGR2可能通过调节囊泡运输的功能来影响PCV2的复制能力.

关键词：SYNGR2、猪圆环病毒2型、转录组测序、RAB27A、囊泡

所属期刊栏目：54

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省基础与应用基础研究基金项目2019B1515210030

在线出版日期：2023-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：3824-3835