基于转录组学研究双酚A对猪睾丸支持细胞炎症和氨基酸代谢通路的影响

摘要：

旨在研究猪睾丸支持细胞(ST)暴露于环境雌激素双酚A(BPA)不同时间后的基因表达谱变化.本研究将猪ST细胞设为C、B两组,每组设置3个重复,C组为空白对照组,B组细胞暴露于50μmol·L-1浓度的BPA.BPA暴露6、24 h后,收集C6、B6、C24、B24组细胞总RNA样品,构建测序文库,通过双端150 bp测序方法进行高通量转录组测序.对组装数据进行功能注释、差异基因分析以及GO和KEGG富集分析.通过Real-time PCR方法对关键差异基因表达进行验证.BPA暴露24 h后差异基因数量(6 928个)较BPA暴露6 h差异基因数量(3 940个)明显增加.编码分泌型磷蛋白1的SPP1基因在BPA暴露6 h后表达增加,但在BPA暴露24 h后表达降低.管腔结合蛋白编码基因BIP、泛素B编码基因UBB、泛素C编码基因UBC、鸟氨酸脱羧酶1编码基因ODC1表达量在BPA暴露6和24 h后均显著上调.富集分析结果表明,BPA暴露6 h后,TNF信号通路富集差异倍数最高,p53、IL-17以及MAPK信号通路等也均显著富集,暗示ST细胞表现出明显的促炎反应.在BPA暴露24 h后,氨基酸及糖代谢通路富集差异倍数最高,包括精氨酸和脯氨酸、组氨酸以及糖酵解代谢通路.Real-time PCR验证结果显示,BPA暴露6 h后炎性反应通路相关的PTGS2等以及BPA暴露24 h后氨基酸代谢通路相关ARG1等差异基因表达显著上调.综上可知,BPA对猪睾丸支持细胞的损伤机制呈现明显的时间效应,ST细胞在BPA暴露初期表现出以TNF等信号通路激活为特征的炎性反应,在BPA暴露后期氨基酸及糖代谢显著激活.

关键词：双酚A、猪睾丸支持细胞、转录组测序、富集分析

所属期刊栏目：54

分类号：S828.3(家畜)

资助基金：国家自然科学基金32202881

在线出版日期：2023-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共14页

页码：2858-2871