鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定

摘要：

正痘病毒属病毒的A33和H3L蛋白是其成员共有的中和抗体的两个主要靶标.为检测鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)A33和H3L蛋白同源物的免疫原性及抗体中和活性,以ECTV-Moscow株基因组DNA为模板,PCR扩增A3 3和H3L同源基因EVM135、EVM085目的序列,分别构建pET30a-EVM135、pET30-EVM085原核表达载体,转化Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达,利用镍层析柱纯化并进行逐步透析复性,免疫兔制备多克隆抗体.建立间接ELISA方法测定其抗体效价分别达1∶120 000和1∶360 000,Western blot和IFA证实该多克隆抗体具有良好的特异性和反应性;ECTV病毒中和试验表明抗EVM135多克隆抗体中和效价为1∶16,而抗EVM085多克隆抗体效价为1∶128.本研究通过高效表达EVM135和EVM085蛋白,并分析其免疫原性及抗体中和活性,为深入研究痘病毒致病和免疫机理,进而快速建立其诊断方法,为猴痘防控技术措施的研究奠定基础.

关键词：A33、H3L、原核表达、多克隆抗体、中和活性

所属期刊栏目：54

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国农业科学院创新工程CAAS-ASTIP-2019-LVRI-06

在线出版日期：2023-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：2468-2477