miR-144-5p靶向WNT5a对山羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响

摘要：

旨在探究miR-144-5p靶向WNT5a对山羊颗粒细胞增殖和凋亡的影响.本研究选用2岁健康雷州母山羊的卵巢颗粒细胞来过表达和抑制表达miR-144-5p及WNT5a,通过荧光定量PCR(real-time qPCR,RT-qPCR)、Western blot、双荧光素酶报告基因、CCK-8等技术来探究miR-144-5p与WNT5a对颗粒细胞增殖和凋亡的影响.结果表明,miR-144-5p在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著高于小卵泡颗粒细胞(P＜0.01),WNT5a在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著低于小卵泡颗粒细胞(P＜0.01);CCK-8检测发现,miR-144-5p抑制了 GCs增殖,过表达miR-144-5p后,抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白表达极显著下调(P＜0.01),促凋亡基因BAX的mRNA和蛋白表达极显著上调(P＜0.01);Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著降低(P＜0.01);另外,miR-144-5p能靶向WNT5a抑制其表达.同时,CCK-8检测结果表明,WNT5a可促进GCs增殖,过表达WNT5a后,抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白水平极显著上调(P＜0.01),促凋亡基因BAX的mRNA显著下调(P＜0.05)、蛋白水平极显著下调(P＜0.01),Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著提高(P＜0.01).综上所述,在GCs中,miR-144-5p靶向负调控WNT5a的表达,调控Wnt/β-Catenin通路,进而上调BAX/BCL-2的比值来抑制颗粒细胞增殖并促进其凋亡,这可能对山羊的排卵数和产羔数产生一定的影响.

关键词：颗粒细胞、miR-144-5p、WNT5a、山羊、繁殖

所属期刊栏目：54

分类号：S827.3(家畜)

资助基金：广东省现代农业产业技术体系项目;广东省科技特派员项目

在线出版日期：2023-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共15页

页码：2421-2435