基于绵羊角质形成细胞探究SHH通过Krox20调节IGFBP5的表达影响羊毛弯曲

摘要：

本研究旨在探究音猬因子(Sonic hedgehog,SHH)与羊毛弯曲形成的关系及其调控机制.本研究通过培养原代绵羊角质形成细胞,构建过表达和沉默载体,利用细胞转染、免疫共沉淀、实时荧光定量PCR和Western blot等方法探究SHH与羊毛弯曲的关系,分析SHH是否通过早期生长应答基因2(early growth response 2,EGR2/Krox20)调控胰岛素样生长因子结合蛋白 5(insulin-like growth factor binding proteins 5,IGFBP5)来影响羊毛弯曲.结果显示,体外成功分离培养绵羊原代角质形成细胞,显微镜下呈"铺路石"样,免疫荧光鉴定结果呈阳性表达,CCK-8结果表明细胞生长曲线呈"S"型,符合细胞增殖趋势;过表达和沉默SHH后,羊毛弯曲相关基因KRT71、β-catenin和TCHH的表达量显著升高和降低;过表达Krox20后,羊毛弯曲相关基因的表达量显著升高;免疫共沉淀试验表明,在绵羊角质形成细胞中SHH可以与Krox20相互作用且正调控Krox20;实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,过表达SHH后显著上调IGFBP5的相对表达量,沉默SHH后显著下调IGFBP5的相对表达量;过表达Krox20后IGFBP5的相对表达量显著升高.本研究表明,在绵羊角质形成细胞中SHH通过Krox20调控IGFBP5来影响羊毛弯曲,结果为毛发弯曲性状形成的相关分子调控机制提供了理论依据.

关键词：SHH、羊毛弯曲、绵羊角质形成细胞、Krox20、IGFBP5

所属期刊栏目：54

分类号：S826.2(家畜)

资助基金：山西省自然科学基金201701D121106

在线出版日期：2023-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：2365-2375