布鲁氏菌外膜蛋白16单克隆抗体的制备及初步应用

摘要：

旨在制备布鲁氏菌外膜蛋白16(OMP16)单克隆抗体,建立OMP16抗体竞争ELISA方法,为布病临床防控提供免疫血清学检测手段.本研究选取保守性高、免疫原性良好的布鲁氏菌OMP16,经原核表达获得携带GST或His标签的重组OMP16(rOMP16).利用杂交瘤技术筛选可稳定分泌OMP16特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,经亚型鉴定、细胞核型分析和抗体交叉反应性试验分析单抗性质.制备小鼠腹水并纯化,方阵滴定法建立布鲁氏菌OMP16抗体竞争ELISA方法.结果表明,成功构建OMP16原核表达系统,经表达、纯化获得rGST-uOMP16和rHis-OMP16.筛选到1株遗传稳定的OMP16特异性杂交瘤细胞株,命名为B7;经鉴定,该抗体亚型为IgM-κ型,可识别目的蛋白,与标签蛋白无交叉反应.建立了布鲁氏菌OMP16抗体竞争ELISA方法,该方法与试管凝集试验检测结果相比总体符合率为90.53％,显示出良好的一致性.本研究有望为布鲁氏菌病的临床防控提供特异性高、敏感性好的免疫血清学检测方法.

关键词：布鲁氏菌、外膜蛋白16、原核表达、单克隆抗体、竞争ELISA

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分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2018YFD0500904

在线出版日期：2023-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2083-2091