香猪睾丸间质细胞TAS1R3基因干扰后对自噬相关因子的影响

摘要：

旨在探究TAS1R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响.本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头,采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞.将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中,利用qRT-PCR检测其对TAS1R3基因表达影响,运用qRT-PCR和Western blot检测TAS1R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体(TAS1R1)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、BECN1和微管相关蛋白1轻链3β(MAP1LC3B)表达的影响.结果表明,当TAS1R3基因被干扰后,相较于shRNA-NC对照组,TAS1R1、ERK1、ERK2、mTOR基因mRNA表达量均极显著降低(P＜0.01),自噬因子BECN1和MAP1LC3B表达量极显著升高(P＜0.01).Western b1ot结果表明当TAS1R3基因被干扰后,与shRNA-NC对照组相比,蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低(P＜0.01),而自噬蛋白Beclin 1表达量极显著升高(P＜0.01).本试验通过将TAS1R3基因干扰载体转染至睾丸间质细胞,发现当TAS1R3基因被干扰后可通过影响mTOR基因的表达,调控其下游自噬因子的表达,提示TAS1R3基因与睾丸间质细胞的自噬密切相关,这为进一步研究TAS1R3基因通过调节自噬影响香猪生殖活动提供了借鉴.

关键词：从江香猪、T1R3、RNA干扰、睾丸间质细胞、自噬

所属期刊栏目：54

分类号：S828.2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省科技项目;贵州省科技项目;贵州省科技计划项目

在线出版日期：2023-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1525-1534