LRTN4RL1-AS 通过 miR-27a-3p 靶向 PPARγ调节奶牛乳腺细胞乳脂合成

摘要：

旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARy轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制.本研究以奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)为试验对象,对处理组与对照组进行3个生物学重复,通过实时荧光定量(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、WB(Western blot)、油红O染色和甘油三酯检测、双荧光素酶报告等技术检测lncRNA-LRTN4RL1-AS对BMECs中甘油三酯积累及脂质合成相关基因表达量的影响,验证 LRTN4RL1-AS-miR-27a-3p-PPARγ 存在内源竞争 RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA)的靶向关系.结果表明,LRTN4RL1-AS主要在细胞质中表达,干扰LRTN4RL1-AS后显著抑制了 BMECs的脂滴形成和甘油三酯积累(P＜0.05),显著下调脂质合成相关基因CEBPα(P＜0.01)、CEBPβ(P＜0.01)和PPARy(P＜0.05)表达,且显著上调脂质分解基因HSL表达(P＜0.05);双荧光素酶报告试验发现,转染mimics-miR-27a-3p,LRTN4RL1-AS突变型组荧光素酶活性显著高于LRTN4RL1-AS野生型组(P＜0.01),证实LRTN4RL1-AS与miR-27a-3p之间存在靶向结合关系;共转染试验发现,inhibitor-miR-27a-3p逆转了干扰LRTN4RL1-AS对乳脂合成的抑制作用(P＜0.05),同时降低了 si-LRTN4RL1-AS对PPARγ基因的表达抑制.结果显示,LRTN4RL1-AS通过竞争性结合miR-27a-3p调控PPARγ表达来调节BMECs乳脂合成.

关键词：乳脂肪、lncRNA、PPARy、miR-27a-3p

所属期刊栏目：54

分类号：S823.91(家畜)

资助基金：陕西省自然科学基金2021JM-100

在线出版日期：2023-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：1465-1477