GnIH基因克隆、表达及对幼龄公兔生殖激素的影响

摘要：

旨在获得兔促性腺激素抑制素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)基因,检测其在不同组织和不同发育阶段下丘脑中的表达水平,研究其对幼龄公兔生殖激素分泌的影响.本研究以90日龄健康闽西南黑兔公兔为研究对象,采用RACE技术(rapid-amplification of cDNA ends)从下丘脑组织中克隆出GnIH基因,并对序列进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR方法(real-time quantitative PCR,qPCR)检测GnIH基因mRNA在90日龄公兔不同组织表达水平(n=5)及11、30、60、90、120、150日龄公兔下丘脑中的表达水平(n=6);连续10 d向80日龄公兔分别注射0、0.5、5和50 μg鹌鹑GnIH相关肽(n=10).第11天早上采集耳静脉血液后,屠宰公兔,采集睾丸组织,分别检测血清中生殖激素浓度(GnRH、FSH、LH、INHB和T)和睾丸组织中睾酮合成相关酶基因(StarR、3β-HSD和p450scc)mRNA的表达水平.结果表明,兔GnIH基因cDNA全长904 bp,包含5'UTR 41 bp,CDS 区 606 bp,3'UTR 227 bp,编码201个氨基酸.该基因在90日龄公兔大部分组织中均有表达,其中在下丘脑中表达最高(P＜0.001);在11到150日龄公兔下丘脑中,90日龄的表达量最低(P＜0.01),90日龄后随着日龄增长其表达量极显著增加(P＜0.001).注射GnIH后,50 μg剂量组幼龄公兔的血清睾酮浓度极显著低于对照组和0.5μg剂量组(P＜0.001),5 μg剂量组睾酮浓度显著低于对照组和0.5 μg剂量组(P＜0.05),50 μg剂量组的LH浓度显著高于对照组(P＜0.05);此外,5μg组的p450scc mRNA表达量极显著高于其他处理组(P＜0.001),而其他组睾酮合成相关酶基因表达量则差异不显著(P＞0.05).结果提示,GnIH基因可能与LH和睾酮的分泌与合成有关,并参与公兔的生殖发育调控,长期注射高剂量GnIH相关肽会导致公兔对药物不敏感,其具体调控机制还需后续研究.

关键词：GnIH、闽西南黑兔、基因克隆、基因表达、生殖激素

所属期刊栏目：54

分类号：S829.1(家畜)

资助基金：国家兔产业技术体系项目;福建省自然基金项目;福建省科技计划;福建省农业科学院科技创新团队建设项目

在线出版日期：2023-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：201-212