非洲猪瘟病毒多基因家族MGF360-13L基因功能的初步研究

摘要：

旨在初步探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)多基因家族MGF360-13L基因的功能.使用生物信息学软件对MGF360-13L基因进行分析;构建真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L并转染至293T细胞进行表达;利用同源重组方法构建基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,以相同的感染复数(MOI=0.01)在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中感染基因缺失毒株和亲本毒株(ASFV CN/GS/2018)后,利用红细胞吸附试验(HAD)计算病毒滴度并绘制体外生长曲线;以MOI=1将ASFV-ΔMGF360-13L和ASFV CN/GS/2018分别感染猪骨髓巨噬细胞(BMDM),利用qPCR和ELISA测定细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-a的表达水平.结果表明,MGF360-13L基因在ASFV基因Ⅱ型中相对保守,编码蛋白属于非分泌型、无跨膜区、亲水性好;构建的真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L被293T细胞表达;成功获得 MGF360-13L单基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,与ASFV CN/GS/2018相比,其体外复制没有显著性差异;在ASFV-ΔMGF360-13L感染BMDM后,IL-1β、IL-6和TNF-a炎性细胞因子在转录和分泌水平都显著高于ASFV CN/GS/2018.本研究成功制备了 ASFV的MGF360-13L基因缺失毒株,并证实了 MGF360-13L基因作为ASFV复制非必需基因具有抑制炎性因子表达的功能,这为进一步注释ASFV MGF360-13L基因功能提供了线索.

关键词：ASFV、MGF360-13L、炎性因子、生长曲线测定

所属期刊栏目：53

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;甘肃省科技重大专项;中国农业科学院基本科研业务费

在线出版日期：2023-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：4419-4428