检测产单核细胞李氏杆菌溶血素的胶体金试纸条制备及初步应用

摘要：

产单核细胞李氏杆菌为重要的食源性病原菌,本研究旨在建立快速、灵敏、特异的检测方法,提高检测效率和检测通量.李氏杆菌溶血素(LLO)蛋白经原核表达后,制备单克隆抗体,测定单克隆抗体的亚型、效价及亲和力.柠檬酸钠法研制LLO胶体金试纸条,并对试纸条的特异性、敏感性、重复性、稳定性及模拟样品进行检测,并初步应用于实际海产品的检测.结果发现,制备的LLO单克隆抗体特异性强、稳定性高、重复性佳、灵敏度较高,亲和力好,亲和力常数为4.25×108 L·mol-1.人工污染样品试验表明灵敏度与纯细菌培养物基本一致,为3.0×105CFU·mL-1.将LLO胶体金试纸条应用于500份海产品的实际检测中,产单核细胞李氏杆菌的阳性检出率为2.20％(11/500),略低于国标检测方法(GB4789.30-2010)的 2.40％(12/500)和 PCR 检测方法的 2.40％(12/500),三者之间符合率为91.67％.另外缩短检测时间至15 min,检测效率大幅度提高.本研究建立的LLO胶体金检测方法可用于产单核细胞李氏杆菌的快速检测.

关键词：产单核细胞李氏杆菌、李氏杆菌溶血素、单克隆抗体、胶体金试纸、海产品初步应用

所属期刊栏目：53

分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省自然科学基金;浙江省科技厅公益技术研究农业项目

在线出版日期：2022-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1841-1848