lncRNA-6617调控猪肌内前体脂肪细胞分化的筛选与功能研究

摘要：

旨在探究lncRNA-6617的生物学特性及其对猪肌内前体脂肪细胞分化的影响,以及初步探究其上游调节机制,为后续深入研究猪肌内脂肪沉积调控机制提供参考依据.本研究以饲养在相同条件下的1、90、180日龄健康马身公猪(n=3)和大白公猪(n=3)为研究对象,利用RNA-seq技术筛选脂肪型猪(马身猪)和瘦肉型猪(大白猪)肌肉特异表达的IncRNAs,并通过生物信息学分析、RT-PCR及Sanger测序鉴定lncRNA-6617生物学特性及其猪组织中的表达特征.在猪肌内前体脂肪细胞中干扰lncRNA-6617,检测lncRNA-6617对肌内脂肪细胞分化能力的影响.随后,检测m6 A修饰相关酶在不同品种猪中的表达差异,研究lncRNA-6617的上游调控机制.结果显示,lncRNA-6617位于猪18号染色体,RAMP3基因反义链的第3内含子区域,无蛋白编码能力,主要分布于细胞核;lncRNA-6617在猪所检测各组织中均有表达,背部皮下脂肪中表达量最高,且在马身猪肌肉组织中的表达极显著高于大白猪(P＜0.01);在猪肌内前体脂肪细胞分化过程中,lncRNA-6617表达量呈上升趋势,且在分化第5天表达量达到最高;干扰lncRNA-6617诱导分化7 d后,分化的成熟脂肪细胞明显减少,成脂关键基因CEBPα、PPARγ和aP2的表达均极显著下调(P＜0.01).m6 A修饰的去甲基化酶FTO在马身猪背最长肌和股二头肌中的表达极显著高于大白猪(P＜0.01),在腰大肌中的表达显著高于大白猪(P＜0.05),上游调节因子ZNF217在马身猪肌肉组织中的表达极显著高于大白猪(P＜0.01),与lncRNA-6617表达模式一致.干扰 FTO后,lncRNA-6617的表达极显著下调(P＜0.01).本研究筛选了在马身猪肌肉组织中显著高表达的lncRNA-6617,并深入研究了 lncRNA-6617 促进猪肌内前体脂肪细胞分化的功能及其上游调节机制,丰富了脂肪细胞生成的表观调控网络.

关键词：马身猪、lncRNA-6617、m6A、肌内脂肪细胞、成脂分化

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分类号：S828.2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金;三晋学者人才项目;三晋学者人才项目;山西省青年基金;山西省优秀博士奖励;山西农业大学科技创新

在线出版日期：2022-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1712-1722