非洲猪瘟病毒p72蛋白阻断ELISA检测方法的建立

摘要：

本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白阻断ELISA抗体检测方法.以纯化的重组p72蛋白作为包被抗原,HRP标记的6E5抗体作为阻断抗体,通过对反应条件进行优化,建立了基于ASFV p72蛋白的阻断ELISA方法.用建立的阻断ELISA方法检测119份临床阴性血清,计算血清阻断率确定临界值,确定了该方法的判定标准:当阻断率PI≥50％时判定为ASFV抗体阳性;PI＜40％时判定为ASFV抗体阴性;当阻断率介于两者之间时,判定为可疑.该方法与猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、A型塞内卡病毒、猪口蹄疫病毒、猪大肠杆菌、猪多杀性巴氏杆菌、副猪格拉瑟菌和猪胸膜肺炎放线杆菌的抗体阳性血清无交叉反应,批间、批内试验的变异系数均小于15％.用该方法与商品化ASFV抗体检测试剂盒同时检测447份猪临床血清样品,两种方法的相对敏感性和相对特异性分别为95.3％和94.5％,符合率为94.9％.本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的敏感性和良好的特异性,可用于ASFV感染诊断和流行病学调查.

关键词：非洲猪瘟病毒、p72蛋白、单克隆抗体、阻断ELISA

所属期刊栏目：53

分类号：S852.659.1;S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;现代农业产业技术体系

在线出版日期：2022-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1509-1516