玉米赤霉烯酮致PC12细胞自噬流阻滞的相关作用机制

摘要：

旨在研究玉米赤霉烯酮(ZEA)对PC12细胞自噬流阻滞的作用机制,以PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤系)为研究材料,以不同浓度的ZEA处理24 h,CCK-8检测细胞存活率,并筛选ZEA最适浓度,分别设置Con组、15 μmol·L-1 ZEA 组、30 μmol·L-1 ZEA 组,Western blot 检测自噬相关蛋白 ATG5、LC3 Ⅱ、p62、Beclin1,溶酶体相关膜蛋白LAMP1,组织蛋白酶B(CTSB)和组织蛋白酶D(CTSD),细胞质及细胞核内TFEB蛋白以及自噬体溶酶体融合相关蛋白STX17和SNAP29的蛋白表达水平;免疫荧光技术检测LC3荧光聚点,TFEB入核情况;mRFP-GFP-LC3检测自噬流情况;AO染色观察细胞内酸性环境变化情况.结果显示,与对照组相比,ZEA处理组中自噬相关蛋白ATG5、LC3 Ⅱ、p62、Beclin1蛋白表达水平均显著上升(P＜0.05);免疫荧光检测显示LC3荧光聚点逐渐增加;mRFP-GFP-LC3检测表明自噬流阻滞;ZEA处理组中的细胞质蛋白CTSD及CTSB表达水平均显著升高(P＜0.05),LAMP1表达水平在ZEA为30 μmol·L-1时显著下降(P＜0.05);AO染色表明,ZEA可致PC12细胞酸性环境改变,导致溶酶体损伤;p-ERK及核内TFEB蛋白表达水平显著下降(P＜0.05),而细胞质内TFEB蛋白表达水平未见显著性变化;SNAP29、STX17蛋白表达水平均显著下降(P＜0.05).综上表明,ZEA可引起PC12细胞自噬水平升高,自噬体增多,并伴随自噬流阻滞,其作用机制与ZEA致溶酶体损伤,抑制TFEB人核,降低自噬体与溶酶体融合相关蛋白表达有关.

关键词：玉米赤霉烯酮、PC12细胞、自噬流、自噬流阻滞

所属期刊栏目：53

分类号：S859.82(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;江苏高校优势学科建设工程资助项目

在线出版日期：2022-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1270-1279