犬源牛犬细小病毒和犬圆环病毒二联PCR检测方法的建立及应用

摘要：

本研究旨在建立可同时检测犬源牛犬细小病毒(CBoV)和犬圆环病毒(CCV)的二联PCR检测方法,并对两种病毒病当前的流行情况进行监测和调查.分别将已发表的CBoV和CCV基因组序列进行同源性比对,选择高同源区段,应用Primer Primier 5计算机软件设计并合成了2对特异性扩增引物,目的片段大小分别为170 bp(CBoV)和239 bp(CCV).分别提取CBoV和CCV重组质粒作为模板,进行二联PCR扩增试验.结果表明,本研究成功建立了可同时检测CBoV和CCV的二联PCR检测方法.并对其重复性、特异性和灵敏度进行验证,二联PCR最低检测限度为3.0 pg总DNA,而对犬细小病毒2型、犬瘟热病毒和犬副流感病毒的PCR检测结果均为阴性.对送检的30份病料进行检测,其中,4份为CBoV阳性,3份为CCV阳性,未检测到混合感染.综上所述,本研究所建立的CBoV和CCV二联PCR诊断方法特异性高,敏感性好,可用于临床犬腹泻病的流行病学调查.

关键词：犬源牛犬细小病毒、犬圆环病毒、二联PCR

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分类号：S852.655(动物医学（兽医学）)

资助基金：在青高校服务青岛重点学科兽医学025/1119002;国家重点研发计划;国家重点研发计划;青岛农业大学高层次人才科研基金项目

在线出版日期：2022-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：978-982