绵羊miR-200b对卵泡颗粒细胞周期和凋亡的影响

摘要：

旨在揭示miR-200b在绵羊卵泡颗粒细胞的作用.本研究利用在线工具(TargetScan、miRTarBase及miRDB)预测miR-200b的靶基因,并利用KOBAS对其进行GO和KEGG通路富集分析.将分离培养的绵羊卵泡颗粒细胞分为4组,分别转染miR-200b mimic、mimic NC、miR-200b inhibitor和inhibitor NC,每组6个重复.采用CCK8法分别检测转染24、48和72 h颗粒细胞的存活率;采用荧光定量PCR检测miR-200b、CDK4、CDK6、CC-ND1、CCND2、Bax和Bcl-2基因的表达水平.利用3种在线工具预测到25个miR-200b的共同靶基因,GO和KEGG通路富集分析发现这些基因富集在细胞的增殖分化、细胞周期及生殖发育过程;转染miR-200b mimic、miR-200b inhibitor和NC后,颗粒细胞存活率随时间延长呈"V"型趋势降低,且48 h达最低(P＜0.01);miR-200b in-hibitor与inhibitor NC组相比,miR-200b表达量无显著差异(P＞0.05);与mimic NC相比,miR-200b mimic组极显著促进miR-200b表达(P＜0.001),显著下调CDK4(P＜0.01)、CDK6(P＜0.001)和CCND1(P＜0.001)、CCND2(P＜0.05)和Bcl-2(P＜0.01)基因表达水平,Bax表达并无显著变化(P＞0.05),且极显著下调Bcl-2与Bax比值(P＜0.001).综上所述,miR-200b抑制绵羊卵泡颗粒细胞细胞周期和增殖并促进其凋亡.

关键词：miR-200b;细胞周期;凋亡;颗粒细胞;绵羊

所属期刊栏目：52

分类号：S826.3(家畜)

资助基金：河北省研究生创新项目;河北农业大学精准畜牧学科群建设项目;河北省自然科学基金项目

在线出版日期：2022-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：3471-3479