猪RNA聚合酶Ⅱ单克隆抗体的制备与应用

摘要：

旨在制备猪RNA聚合酶Ⅱ的单克隆抗体并进行初步应用.本研究采用生物信息方法预测免疫原,将其化学合成后免疫5只4～8周龄Bal b/c雌性小鼠,对免疫后呈现阳性的小鼠进行细胞融合试验,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合并获得能稳定分泌抗RNA PolⅡ的杂交瘤细胞.鉴定结果显示,RNA PolⅡ单克隆抗体的重链为IgG 2A型,轻链为Kappa型.利用间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了 8株稳定分泌RNA PolⅡ单克隆抗体的杂交瘤细胞株.将其初步应用到染色质免疫共沉淀(ChIP-seq)技术,并与商业化抗体的富集性进行比较,结果表明,本研究得到的单克隆抗体富集性更强.本研究获得的猪RNA PolⅡ单克隆抗体可为表观遗传学的研究提供理论基础,并且提供重要的生物学材料.

关键词：RNA PolⅡ;单克隆抗体;猪;杂交瘤细胞

所属期刊栏目：52

分类号：S852.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;武汉市应用基础前沿项目

在线出版日期：2021-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2783-2791