5-Aza-dC对牛成肌细胞MyoD1启动子甲基化及mRNA表达的影响

摘要：

旨在探究5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)对牛成肌细胞的增殖和肌分化因子(myo-genic differentiation 1,MyoD1)启动子甲基化以及mRNA表达的影响.本研究复苏了前期冻存的关岭牛成肌细胞,并进行培养,待其生长到对数生长期,再通过不同浓度的5-Aza-dC对牛成肌细胞进行处理,利用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期;结合高通量检测方法检测MyoD1启动子甲基化水平,并利用qRT-PCR检测MyoD1及相关基因的表达水平.研究发现,0.1 μmol·L-15-Aza-dC为最适浓度,该浓度下细胞抗凋亡因子Bcl的表达极显著降低(P＜0.01),促凋亡因子Bax的表达极显著提高(P＜0.01),促凋亡因子Caspase-9的表达显著提高(P＜0.05);周期因子Cyclin A2的表达显著提高(P＜0.05),而细胞因子Cyclin B1、CyclinD的表达无显著变化;检测空白组和试验组MyoD1启动子甲基化水平发现,试验组甲基化水平极显著低于空白组(P＜0.01);而mRNA的表达水平极显著高于空白组(P＜0.01).5-Aza-dC能够通过改变Caspase-9、Bcl、Bax、Cyclin A2等基因的表达来调节关岭牛成肌细胞的增殖和凋亡,并能够有效降低MyoD1基因启动子的甲基化水平(P＜0.01);极显著提高其mRNA的表达量(P＜0.01).低浓度的5-Aza-dC能通过促进细胞凋亡及调控关岭牛MyoD1的甲基化水平来调控MyoD1的表达;同时推测,MyoD1基因启动子的甲基化水平能够影响关岭牛成肌细胞的生长发育,可为遗传标记辅助关岭牛的改良提供理论参考.

关键词：关岭牛;5-氮杂-2-脱氧胞苷;DNA甲基化;细胞周期;细胞凋亡

所属期刊栏目：52

分类号：S823.81;S823.2(家畜)

资助基金：国家科技支撑计划;贵州省农业重大产业科学研究攻关项目

在线出版日期：2021-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：2439-2451