反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用

摘要：

为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了 TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进行检测.结果显示,本方法特异性强,与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体无交叉反应;TaqMan和Eva Green荧光定量PCR对pCS20质粒标准品的最低检测限分别为17.4拷贝·μL-1和1.74拷贝·μL-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5％.对420只钝眼蜱样本的检测显示,TaqMan和Eva Green荧光定量PCR的检出率分别为25.48％和29.29％,与套式PCR检测方法相比,敏感性更高.本研究为反刍动物埃立克体的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法.

关键词：反刍动物埃立克体;pCS20基因;TaqMan荧光定量PCR;Eva Green荧光定量PCR

所属期刊栏目：52

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省自然科学基金项目;海关总署科技计划项目

在线出版日期：2021-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1975-1982