抗非洲猪瘟病毒单链抗体的构建、表达及活性鉴定

摘要：

制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)猪源单链抗体(ScFv),并对其生物学活性进行鉴定,筛选出具有ASFV反应活性的猪源单链抗体(ScFv),为ASFV的诊断提供新的材料.采集ASFV感染康复猪的外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,以此为模板通过PCR扩增得到猪源IgG重链可变区与轻链可变区基因,利用SOE-PCR技术扩增拼接得到猪源ScFv基因;构建pET-30a-ScFv表达载体,进行蛋白的表达与纯化,用ELISA和IFA鉴定ScFv抗体的反应活性.结果显示,成功扩增出猪源ScFv(VH-VLκ、VH-VLλ)基因,鉴定到1株与ASFV存在反应活性的ScFv(VH-VLλ11)抗体.结果表明,成功筛选到1株与ASFV存在反应活性的ScFv(VH-VLλ11)抗体,为ASFV诊断和防控提供了新型原材料.

关键词：非洲猪瘟病毒、SOE-PCR、单链抗体、诊断与防控

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2018YFC0840400

在线出版日期：2021-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1328-1336