性控奶山羊精液X和Y精子分离比例检测方法的建立

摘要：

旨在建立可以定量计算奶山羊精液中X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法,用以检测经过分离的奶山羊精液X和Y精子的数量和比例,为性控技术的开发和生产应用提供技术支撑.本研究选择X、Y染色体中特异基因F9及ZFY片段设计引物,建立标准曲线,优化荧光定量PCR反应体系和条件.通过对阳性标准品梯度稀释以及对60支已知纯度的性控精液进行测定(3次重复)来检验方法的敏感性和可靠性.结果显示,所建立的双重TaqMan荧光定量PCR方法特异性和重复性好,X和Y精子检测灵敏性分别为47和51 copies ? μL-1;利用该方法对商品化的奶山羊性控冷冻精液中X和Y精子的数量和比例进行计算,其结果与销售公司提供的X和Y精子的纯度无显著差异(P＞0.05),表明该方法结果可靠.本研究建立的计算奶山羊X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法特异性和重复性好,灵敏度高,结果可靠,为计算奶山羊精液分离后X、Y精子数量及比例提供了快速可靠的方法.

关键词：X和Y精子分离、实时荧光定量PCR、性别控制、奶山羊

所属期刊栏目：52

分类号：S827.3(家畜)

资助基金：陕西省农业科技创新重点项目;陕西省重点研发计划项目

在线出版日期：2021-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：107-115