1群4型禽腺病毒的分离鉴定及Fiber-2蛋白的免疫效果分析

摘要：

旨在鉴定河南某蛋鸡场以心包积液、肝肿大出血为特征的病原,并对病原的免疫原性蛋白进行表达和效果分析.本研究采用病毒分离、血清学试验、PCR检测及测序分析、动物回归试验、大肠杆菌表达、蛋白纯化、攻毒保护等方法进行研究.结果 显示,所采集样品经卵黄囊途径接种7日龄SPF鸡胚,盲传2代后获得病毒;PCR可扩增出约900 bp的Hexon基因片段,经测序,其Hexon基因与血清C4型毒株的相似性为100％;血清中和试验结果表明分离的禽腺病毒为1群血清4型禽腺病毒,命名为HN-ZK株.该毒株可在鸡胚原代肝细胞上产生CPE,病毒含量可达107.5TCID50·0.1 mL-1.动物回归试验表明,该分离毒株可使35日龄SPF鸡100％ (10/10)表现出发病症状.以分离株的DNA为模板,利用大肠杆菌原核表达系统,获得相对分子质量约为33 ku的Fiber-2蛋白,离心浓缩、纯化后蛋白含量为300 mg·mL-1.将表达的Fiber-2蛋白用不同的剂量免疫SPF鸡,结果表明20μg·只-1的剂量能使鸡完全抵抗强毒株的攻击,说明Fiber-2蛋白具有较好的免疫原性.本研究可为禽心包积水-肝炎综合征的诊断和基因工程亚单位疫苗的研制提供数据参考.

关键词：Ⅰ群禽腺病毒、鉴定、Fiber-2蛋白、亚单位疫苗

所属期刊栏目：51

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：青岛市动物保健品行业智库联合基金二期18-6-3-1-jch科技服务计划科技金融专项-智库基金

在线出版日期：2020-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2463-2471