Ide基因通过AKT调控成肌细胞增殖和分化的研究

摘要：

旨在了解胰岛素降解酶(insulin-degrading enzyme,Ide)在猪不同组织中的表达情况,及其在C2C12成肌细胞增殖和分化中的作用.本研究利用RT-PCR和Western blotting技术检测了Ide在8月龄雄性小型猪不同组织中的表达;利用siRNA技术干扰Ide表达,检测了Ide在C2C12成肌细胞增殖、凋亡和分化中的作用,试验分为Ide-siRNA处理组和NC-siRNA(negative control)对照组,每组3个重复.结果显示,Ide在猪的不同组织(包括大脑、股四头肌、股二头肌、背最长肌、心、肝、脾、肺、肾和睾丸)中广泛表达,其中,在股四头肌、肾和睾丸中表达量相对更高.Ide-siRNA转染成肌细胞48 h后,Ide表达量极显著下降(P<0.001).CCK-8检测显示,干扰Ide表达促进了成肌细胞的增殖,细胞周期相关基因表达也显著升高,同时发现干扰I de表达未引起成肌细胞凋亡.利用2％马血清诱导成肌细胞分化的同时转染Ide-siRNA以干扰其表达,在分化的第2和5天发现,与对照组相比,分化相关基因Myog、Myhc等在干扰组中的表达均显著下降,提示成肌细胞的分化受到了抑制.进一步的研究还发现,在分化的第5天,Akt2和磷酸化的AKT(P-AKT)表达量下降.综上,Ide在猪的不同组织中广泛表达,以肌肉、肾和睾丸中表达量更高.干扰Ide表达促进C2C12成肌细胞的增殖,分化时干扰Ide表达则通过Akt2/P-Akt/Myog途径抑制C2C12成肌细胞的分化.

关键词：胰岛素降解酶(Ide)、猪、成肌细胞、增殖和分化、AKT

所属期刊栏目：51

分类号：S813.3(普通畜牧学)

资助基金：国家自然科学基金;中央级公益性科研院所基本科研业务费项目

在线出版日期：2020-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1784-1794