牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法.根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法.该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102～2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44％;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2％,重复性好.对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31％(25/221),采样场阳性率为92.86％(13/14).本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段.

关键词：牛诺如病毒、实时荧光定量PCR、犊牛腹泻、检测

所属期刊栏目：51

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省重点研发与推广专项;国家肉牛牦牛产业技术体系;国家重点研发计划

在线出版日期：2020-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1728-1736