miR-106b-5p靶向KLF4调控山羊肌内前体脂肪细胞分化

摘要：

旨在明确miR-106b-5p对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响,并确定这种作用是通过靶向KLF4来实现的.本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达模式,通过脂质体转染技术将miR-106b-5p mimic和miR-106b-5p inhibitor转人体外培养的山羊肌内前体脂肪细胞,油红O染色法从形态学验证miR-106b-5p对脂肪细胞中脂滴积聚的影响,qRT-PCR检测预测的靶标基因KLF4和脂肪分化标志基因的表达情况,利用双荧光素酶报告系统鉴定miR-106b-5p与KLF4的靶标关系.qRT-PCR结果显示,miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化第3天时表达量最高.在山羊肌内脂肪细胞中干扰miR-106b-5p后油红O染色显示脂滴聚积减少,过表达miR-106b-5p后脂滴聚积增加.在山羊肌内前体脂肪细胞中转染miR-106b-5p inhibitor后PPARγ表达量显著降低(P＜0.05),而KLF4表达量极显著升高(P＜0.01);转染miR-106b-5p mimic后LPL和PPARγ表达量极显著升高(P＜0.01).荧光素酶活性试验结果显示,过表达miR-106b-5p可显著抑制KLF4荧光活性.miR-106b-5p通过靶向并负调节KLF4的表达促进山羊肌内脂肪细胞分化.

关键词：山羊、miR-106b-5p、KLF4、脂肪细胞、荧光素酶活性试验

所属期刊栏目：51

分类号：S827.2(家畜)

资助基金：国家重点研究计划专项;国家自然科学基金;四川省应用基础研究计划重点项目

在线出版日期：2020-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1219-1228