猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用

摘要：

为了制备能够用于阻断ELISA检测的猪肺炎支原体(Mycop lasma hyop neumoniae,Mhp)单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的Mhp J株P97蛋白C末端包含R1区的肽段(P97CR1)作为免疫原免疫BALB/C雌鼠,筛选获得一株能稳定分泌抗Mhp P97蛋白MAb的杂交瘤细胞株A3.鉴定结果显示,A3 MAb是IgG1亚类,轻链为K链.Western blot结果显示A3 MAb能够和原核表达纯化的P97CR1蛋白特异性反应,并且在流式细胞仪分析中能够识别天然的Mhp.通过逐渐截短表达分析该MAb识别的表位序列为LDDNLQ,该抗原表位在Mhp菌株中高度保守.阻断ELISA初步试验结果显示,A3 MAb与蛋白抗原的结合能够被Mhp高免阳性血清阻断.该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的Mhp阻断ELISA检测方法奠定了基础.

关键词：猪肺炎支原体、单克隆抗体、P97蛋白、表位鉴定

所属期刊栏目：51

分类号：S852.62;R375.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：兽医生物技术国家重点实验室自主研究课题;中央级公益性科研院所基本科研业务费专业

在线出版日期：2020-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1110-1118