miR-33a靶向Lipin1和IRS2调节绵羊前体脂肪细胞分化的研究

摘要：

旨在揭示miR-33a在绵羊前体脂肪细胞分化中的生物学功能.本研究以15日龄雄性绵羊背部皮下前体脂肪细胞为试验材料,所有的试验均设立3个重复;利用生物信息学软件预测miR 33a的靶基因,并通过双荧光素酶报告试验对预测的潜在靶基因进行验证;用qPCR和Western blotting分别检测miR-33a、Lipin1和IRS2及其编码蛋白的表达,以揭示miR-33a与其靶基因在绵羊前体脂肪细胞分化中的表达规律;慢病毒介导实现miR-33a的过表达和干扰后,检测Lipin1、IRS2和成脂标志基因的表达,并用油红O染色检测脂滴沉积能力,以解析miR-33a对其靶基因的调节机制.生物信息学分析发现,miR-33a与Lipin1和IRS2 3'-UTR都存在结合位点,miR-33a显著下调Lipin1和IRS2野生型双荧光质粒的相对荧光活性(P＜0.05);在绵羊前体脂肪细胞分化中,miR-33a与Lipin1和IRS2的表达趋势相反;过表达miR-33a后,显著下调了Lipin1 (P＜0.01)和IRS2(P＜0.05)及其编码蛋白以及成脂标志基因的表达;干扰miR-33a后,这些基因和蛋白的表达则显著上调;过表达miR-33a减少了脂滴沉积,干扰miR-33a促进了脂滴沉积.在绵羊前体脂肪细胞分化中,miR-33a与Lipin1和IRS2的表达呈负相关.miR-33a靶向Lipin1和IRS2的3'UTR抑制绵羊前体脂肪细胞分化和脂滴沉积.

关键词：miR-33a、Lipin1、IRS2、绵羊、脂肪细胞分化

所属期刊栏目：51

分类号：S826.2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金;山西省“1331工程”重点学科建设计划

在线出版日期：2020-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：701-712