SIRT1对牦牛卵母细胞体外成熟与老化的影响

摘要：

旨在探索 SIRT1在牦牛卵母细胞体外成熟与老化过程中的作用.本研究在体外成熟液中分别添加SIRT1特异性激动剂 SRT2104(SRT组)和特异性抑制剂 Inauhzin(INZ组),牦牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外培养 24 h后,观察卵丘细胞的扩展和第一极体的排出情况;利用免疫荧光检测体外培养 24 与 36 h后卵母细胞内的 ROS水平;采用实时荧光定量 PCR法检测体外培养 24与 36 h后卵母细胞内 SIRT1、FOXO3a 、SOD2以及Bax的表达水平;体外培养 24与 36 h后的牦牛卵母细胞进行体外受精,观察并统计其卵裂率与囊胚形成率.结果显示,体外培养 24 h,SRT组的卵丘细胞扩展程度显著高于对照组(P＜0.05),而 INZ组的卵丘细胞扩展程度和第一极体排出率显著低于对照组(P＜0.05).随着体外培养时间的增加,卵母细胞内的 ROS水平显著增加(P＜0.05);添加 SRT2104能显著抑制卵母细胞中 ROS水平的积累(P＜0.05),而添加 Inauhzin则显著上调卵母细胞内的 ROS水平(P＜0.05).体外培养 24 h后,SRT组 SIRT1,FOXO3a与 SOD2的表达水平显著高于对照组(P ＜0.05),但 Bax的表达水平显著降低(P＜0.05); INZ组的 SIRT1,FOXO3a与 SOD2表达均显著低于对照组(P＜0.05),但 Bax的表达水平显著上调(P＜0.05).牦牛卵母细胞体外培养 24 h后,SRT组的卵裂率与囊胚形成率显著高于 INZ组和对照组(P＜0.05);卵母细胞体外培养 36 h 后,INZ组的卵裂率和囊胚形成率显著低于其他组(P＜0.05).综上表明,SIRT1参与了牦牛卵母细胞的体外成熟,在体外培养液中适当添加 SIRT1激动剂,有利于卵母细胞体外成熟及缓解老化,同时改善早期胚胎的发育能力.

关键词：SIRT1、卵母细胞、成熟、老化、牦牛

所属期刊栏目：50

分类号：S823.85(家畜)

资助基金：国家重点研发专项;西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目;青藏高原生态畜牧业协同创新中心开放基金

在线出版日期：2020-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2440-2448