发酵饲料中乳酸菌含量检测的EMA-qPCR方法

摘要：

旨在快速检测发酵饲料中乳酸菌含量,将叠氮溴乙锭(EMA)与q-PCR技术相结合,通过对诸如EMA浓度、曝光时间等影响EMA的因素进行探索,确定EMA的作用条件.在试验条件下用EMA处理已知浓度的乳酸菌菌液,提取乳酸菌DNA,结合q-PCR建立Ct值与乳酸菌含量对数值之间的标准曲线.利用标准曲线,快速计算发酵饲料中的乳酸菌含量.结果 表明EMA浓度在3～4 μg·mL-1曝光10 min可有效抑制死菌DNA的扩增,从而消除死菌DNA扩增对Ct值的影响.通过对8份发酵饲料进行检测,其结果与平板计数具有较高的符合度.EMA-qPCR方法可用于快速准确地检测发酵饲料中活的乳酸菌含量.

关键词：叠氮溴乙锭、实时荧光定量PCR、乳酸菌含量

所属期刊栏目：50

分类号：S816.601.7(普通畜牧学)

资助基金：河南省现代农业产业技术体系生猪产业技术创新团队S2012-06-G02;国家重点研发计划2016YFD0500702;河南省科技开放合作项目182106000043

在线出版日期：2019-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2166-2170