地方株马驽巴贝斯虫Bc48截短体单克隆抗体的制备及应用

摘要：

本研究旨在建立马驽巴贝斯虫抗体的快速、准确检测方法.以纯化的马驽巴贝斯虫Bc48基因片段的原核表达产物免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备单克隆抗体,并利用重组抗原与单克隆抗体建立间接竞争ELISA(CI-ELISA)方法检测马驽巴贝斯虫抗体.结果 显示:制备出3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1H2、7F4、11F4,通过对CI-ELISA条件筛选得出,抗原最佳包被浓度为0.19 /μg· mL-1,单克隆抗体11F4的最佳工作浓度为1∶3.2×10 5,通过检测30份马驽巴贝斯虫阴性血清及20份阳性血清,确定该检测方法临界值为45％;特异性试验发现,该CI-ELISA方法不与感染马泰勒虫病的阳性血清发生反应,具有特异性;用所建立的CI-ELISA检测临床血清90份,与标准c-ELISA试剂盒总符合率为92.2％、阳性符合率92.1％、阴性符合率94.1％.试验结果表明,该CI-ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便.基于单克隆抗体(11F4)与重组蛋白(HIS-Bc48)所建立的CI-ELISA特异性、重复性好,可为新疆马驽巴贝斯虫的检测、监控提供有效手段.

关键词：马驽巴贝斯虫、Bc48基因、单克隆抗体、CI-ELISA

所属期刊栏目：50

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金地区科学基金项目31660711

在线出版日期：2019-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1882-1887