牛MSTN启动子与MEF2C转录因子相互作用的研究

摘要：

旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制.首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp.其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧光素酶报告载体,采用脂质体法共转染至小鼠C2C12成肌细胞,24 h后检测其双荧光素酶活性.最后,通过PCR扩增MSTN启动子核心片段MSTN-P1,重新构建以MSTN-P1片段替代(CMV)区的重组表达载体pEGFP-N3-MSTN-P1-MEF2C,将其分别转染至小鼠C2C12成肌细胞和大鼠下颌腺上皮细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白发光情况,48 h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR检测MEF2C基因在不同细胞中的表达情况.结果 显示,在小鼠C2C12成肌细胞中,共转染pcDNA3.1(+)-MEF2C试验组较pGL3-Basic-MSTN试验组能显著增强MSTN启动子的活性(P＜0.05),较pGL3-Basic对照组能极显著增强MSTN启动子的活性(P＜0.01);MSTN启动子核心片段MSTN-P1能驱动MEF2C基因在小鼠C2C12成肌细胞中的表达量极显著上调(P＜0.01),且能驱动MEF2C基因在大鼠下颌腺上皮细胞中的表达量显著上调(P＜0.05).结果 表明,在转录水平,MSTN启动子与MEF2C可能同时参与了牛肌肉生长和分化的调控.

关键词：牛、MSTN启动子、MEF2C转录因子、互作

所属期刊栏目：50

分类号：S823.2(家畜)

资助基金：国家科技支撑计划2015BAD03B02-3;教育部促美大项目[2015]2062号

在线出版日期：2019-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1567-1575