犬细小病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPV VP2基因保守序列设计一对能扩增574 bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对其特异性和灵敏度进行了评估.结果 表明,所建立的纳米PCR特异性和灵敏性良好,最低核酸检出量为2拷贝·μL-1,其敏感性比常规PCR高1 000倍.分别采用纳米PCR和常规PCR,对广西省、北京市、吉林省送检的75份疑似CPV的临床样品进行检测,CPV阳性率分别为89.3％(67/75)和70.7％(53/75),表明该方法具有更高的敏感性,适用于CPV低含量临床样品的检测.本方法的建立为CPV感染的早期快速、灵敏、准确的诊断提供了新方法,为CPV的防控奠定基础,具有重大的临床应用意义和价值.

关键词：犬细小病毒、VP2基因、纳米PCR、临床检测

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分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国农业科学院创新工程项目ASTIP-IAS15;中国农业科学院基本科研业务费2018-YWF-YTS-16;“十三五”国家重点研发计划2016YFD0501003,2017YFD0501603

在线出版日期：2019-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1268-1274