鸡恒定链协助抗原肽结合MHC Ⅱ类分子并进入细胞内吞体

摘要：

为探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)的胞质区/跨膜区[Ii(Cyt/Tra)]作为载体是否可携带抗原肽在细胞内结合MHC Ⅱ类分子和进入转运途径的细胞器(内吞体),构建4个基因目的片段[Ii、Ii(Cyt/Tra)、F2(新城疫病毒F蛋白片段)和Ii(Cyt/Tra)/F2],分别将它们插入原核表达载体pET-32a和真核表达载体pmCherry-C1/N1中,构建8个重组质粒,再转入工程菌(E.coli)和人肾细胞系(293 T),并应用拉下法(pull-down)检测目的蛋白与MHCⅡβ的结合,应用激光共聚焦确定它们在真核细胞与MHC Ⅱ β的共定位以及在内吞体的定位.结果表明,构建的重组质粒均能相应地原核或真核表达相应目的蛋白;Ii、Ii(Cyt/Tra)和Ii(Cyt/Tra)/F2不仅能够与MHCⅡβ结合,还能进入细胞内吞体;但是F2既不能与MHC Ⅱ β结合,也不能进入内吞体.Ii活性片段Cyt/Tra不仅本身具有结合MHC Ⅱ β的作用,而且还可以携带抗原肽与之结合并一起转入细胞内吞体而进入抗原递呈途径.该结果为进一步研究Ii载体转运抗原提供了理论依据.

关键词：Ii、活性片段、免疫载体、内吞体、抗原递呈

所属期刊栏目：50

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31572496,31372417

在线出版日期：2019-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：398-405