牛卵泡颗粒细胞PRSS35表达模式及功能研究

摘要：

旨在探究丝氨酸蛋白酶35(serine protease 35,PRSS35)在牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs)中的表达及功能.采用B超超声波检测确定牛优势卵泡(dominant follicle,DF)与从属卵泡(subordinate follicles,SF),分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞;利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在DF与SF的表达情况;免疫组化技术对PRSS35进行定位研究;设计PRSS35 siRNA基因沉默序列,经脂质体转染GCs,测定培养液雌激素(estrogen,E2)浓度和GCs凋亡情况,研究PRSS35对牛卵泡颗粒细胞生长发育的影响.结果表明:1)PRSS35 mRNA在DF中的表达量极显著高于SF(P＜0.001);2)PRSS35在牛DF和SF颗粒层与膜层均有表达;3)PRSS35在DF中的表达量极显著高于SF(P＜0.01);4) PRSS35基因沉默后,GCs凋亡细胞百分率极显著增高(P＜0.001),培养液雌激素浓度极显著降低(P＜0.01).综上表明,PRSS35在牛卵泡颗粒层和膜层均有表达,且在DF表达量极显著高于SF;PRSS35基因沉默后,通过抑制GCs增殖,降低E2分泌浓度,从而抑制牛卵泡的生长发育.该研究为深入探讨PRSS35与牛卵泡发育的关系奠定基础.

关键词：牛、卵泡、颗粒细胞、PRSS35

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分类号：S823.2(家畜)

资助基金：山西省回国留学人员科研资助项目2014-重点5;山西省国际科技合作项目201603D421006;山西省青年三晋学者项目;山西省重点研发计划一般农业项目201703D221020-1;山西农业大学创新基金项目zdpy201403/201503

在线出版日期：2018-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2394-2401