牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要：

本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的RT-PCR方法,并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测.选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物,通过反应条件和体系优化,建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测.结果显示:所建方法特异性和重复性好,灵敏性达到1×10-2 pg·μL-1;该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果,优于比较的两种以BCoV N基因为靶点的RT-PCR方法;对2016年采集的川西北草原牦牛病料进行了BCoV的检测,结果显示;125份腹泻牦牛粪便样本中BCoV的检出率为71.20％,98份患呼吸道疾病的牦牛鼻腔棉拭子中BCoV的检出率为72.45％.此次建立的BCoV RT-PCR检测方法特异性和重复性好、灵敏度高;BCoV是当前川西北草原牦牛腹泻和呼吸道疾病综合征的重要病原.

关键词：牛冠状病毒、RT-PCR方法、牦牛、腹泻、呼吸道疾病综合征

所属期刊栏目：49

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：十三五国家重点研发计划课题2016YFD0500907;国家民委“青藏高原动物疫病防控创新团队”13TD0057;西南民族大学研究生“创新型科研项目”CX2017SZ061

在线出版日期：2018-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2292-2298