羊口疮病毒F1L、B2L基因重组腺病毒构建及对小鼠的免疫效果分析

摘要：

选取自剪切T2A和P2A肽,连接F1L和B2L基因,构建羊口疮病毒(orf virus,ORFV)重组腺病毒,并对其免疫效果进行评价,为羊口疮的疫苗研制提供依据.应用PCR扩增ORFV-F416毒株的F1L、B2L目的基因,构建重组腺病毒穿梭质粒,穿梭质粒与骨架质粒共转染HEK-293细胞,包装出ORFV重组腺病毒.将重组腺病毒感染MDBK细胞,收集上清液免疫ICR小鼠,并进行间接ELISA、淋巴细胞增殖、ORFV攻毒试验等初步评价小鼠免疫效果.结果显示:成功获得pAV-CMV-F1 L-T2A-B2L-P2 A-EGFP重组腺病毒,其TCID50为10-5.375·mL-1,PCR和IFA检测证实目的基因在基因及蛋白水平上均有表达.ORFV重组腺病毒免疫小鼠后,其抗体水平迅速升高.ORFV重组腺病毒组对特异性抗原ORFV表现出明显的T淋巴细胞增殖能力,极显著高于PBS组(P＜0.01).本文的研究结果表明:F1L和B2L基因重组腺病毒能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,且未影响小鼠正常采食,保护效力较好.

关键词：羊口疮病毒、重组腺病毒、构建、免疫效果

所属期刊栏目：49

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科委实验动物专项15140900300,17140900100;上海市农委青年人才计划沪农青字2015第1-36号;上海市农业科学院攀高计划PG171;上海市种业发展项目沪农科种字2017第3-3号

在线出版日期：2018-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1701-1708