猪圆环病毒3型LAMP检测方法的建立与应用

摘要：

为快速诊断和检测猪圆环病毒3型(PCV3),本研究根据其ORF2基因保守序列,设计特异性引物,并通过Bst DNA聚合酶、引物最佳浓度比例、Mg2+、dNTPs 和甜菜碱浓度及反应条件优化,建立了环介导等温核酸扩增(LAMP)检测方法.结果显示,59 ℃ 恒温扩增36 min即可出现梯形条带,且产物亦可通过SYBR Green Ⅰ染色进行判断.该方法最低检测限为1.0×101copies· μL －1,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)及猪圆环病毒1型和2型(PCV1 、PCV2)等均无交叉反应.检测68份呼吸道病猪淋巴结样品,PCV3阳性率占30.9％,与PCR检测结果符合率为95.6％(65/68).相对传统PCR方法而言,该方法敏感特异,简便快速,可用于PCV3检测和临床诊断.

关键词：猪圆环病毒3型、RT-LAMP、检测

所属期刊栏目：49

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31672565 ,31502082;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目KJQN201616;国家生猪现代产业体系建设专项CARS-36

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1314-1319