猴源cathepsin基因shRNA文库及其稳定敲减细胞系的构建

摘要：

目前关于组织蛋白酶(cathepsin)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV)生活周期中发挥功能的研究较少.为了探究宿主细胞中cathepsin在PRRSV吸附、入侵、脱壳、生物合成、组装以及释放过程中的作用,选取源于 MA-104的非洲绿猴胚胎肾上皮细胞Marc145细胞系(对PRRSV易感);利用RNAi原理,构建了以pLKO.1为载体的cathepsin基因shRNA文库;并用puromycin筛选出稳定敲减cathepsin的细胞株.结果显示:本试验构建的cathepsin-shRNA文库包含45个克隆,涉及15种 cathep-sin基因,筛选出的稳定细胞株中相应 cathepsin基因mRNA的表达量均有显著下降.这些细胞株的构建为进一步研究cathepsin在PRRSV生活周期中发挥的重要功能奠定了基础.

关键词：cathepsin、shRNA、Marc145、慢病毒、稳定敲减细胞系

所属期刊栏目：49

分类号：S852.23(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31490601 ,31502031;霍英东教育基金会青年教师基金项目151033

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1282-1290