TGF-β调节仔猪睾丸支持细胞增殖的机制

摘要：

旨在研究TGF-β对仔猪睾丸支持细胞增殖相关蛋白及基因表达的影响,进一步揭示TGF-β调控仔猪支持细胞增殖的作用机制.本研究用TGF-β及TGF-β/Smad通路抑制剂LY2109761处理培养的仔猪睾丸支持细胞,通过CCK-8与流式细胞术检测支持细胞活性和细胞周期,Western blotting检测Smad3的蛋白磷酸化水平,实时定量PCR(RT-qPCR)检测c-Myc mRNA、Skp2 mRNA及ssc-miRNA-24的表达.此外,支持细胞转染sse-miRNA-24模拟物、抑制剂后,用TGF-β处理支持细胞,检测相关基因和蛋白的表达.结果表明,TGF-β以剂量依赖方式影响支持细胞活性;180 pg·mL-1 TGF-β以时间(0～24 h)依赖方式影响细胞增殖指数(Proliferation index,PI)和S期细胞比例(S-phase cell fraction,SPF),抑制Smad3磷酸化,增加c-Myc mRNA、Skp2 mRNA、ssc-miRNA-24的表达;10 μmol·L-1 LY2109761促进TGF-β诱导支持细胞活性,并增加细胞增殖指数和S期细胞比例.sse-miRNA-24模拟物抑制Smad3磷酸化,促进c-Myc、Skp2 mRNA表达;ssc-miRNA-24抑制剂则具有相反的效果.综上表明,在仔猪睾丸支持细胞中,TGF-β可通过增加ssc-miRNA-24的表达,抑制Smad3磷酸化,增强c-Myc与Skp2mRNA的表达,促进支持细胞增殖.

关键词：TGF-β、支持细胞、增殖、Smad3、ssc-miRNA-24

所属期刊栏目：49

分类号：S828.2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金项目31672624,31072183;中央高校基本科研业务费专项资金XDJK2017D029

在线出版日期：2018-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：701-708