细粒棘球绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及诊断价值的初步评价

摘要：

探究细粒棘球绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的基本特性并初步评价其诊断价值,旨在为细粒棘球绦虫的防控提供依据.本研究原核表达出Eg-cystatin重组蛋白并对其进行生物信息学、免疫印迹分析,用荧光免疫定位的方法检测该蛋白质的分布情况,并以绵羊细粒棘球蚴阳性血清评价Eg-cystatin重组蛋白的诊断价值.结果如下:Egcystatin生物信息学分析结果显示,该蛋白质含有一个N端信号肽以及cystatin结构域,是典型的2型半胱氨酸蛋白酶抑制剂,进化树分析显示Eg-cystatin属于绦虫cystatinⅡ型,并且与其他绦虫的cystatin相似性为72.20％～80.66％,免疫荧光定位发现该蛋白质主要分布在原头蚴的表皮和顶突钩,生发层,成虫虫体内部和虫卵.基于Eg-cystatin建立的间接ELISA方法的特异性为79.1％,敏感性为83.3％,与剖检符合率为81.25％.Eg-cystatin在成虫和幼虫时期均有表达,提示该基因与虫体生命活动息息相关,但Eg-cystatin蛋白不适合作为绵羊细粒棘球蚴病的诊断抗原候选.

关键词：细粒棘球绦虫、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、酶联免疫吸附试验、免疫荧光定位

所属期刊栏目：49

分类号：S852.734(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技支撑计划2015NZ0041

在线出版日期：2018-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：572-579