噬菌体Bp7穿孔素holin的克隆、表达及其活性分析

摘要：

为了研究噬菌体Bp7穿孔素holin的特征及其对细菌的抑制作用,根据噬菌体Bp7的基因序列,设计引物PCR扩增穿孔素holin基因,并对其序列进行比对和分析.构建holin原核重组表达质粒pCold-holin,在大肠杆菌BL21中诱导表达,摸索最佳表达条件.亲和层析法纯化蛋白质,并对其抑菌活性进行测定.结果表明,噬菌体Bp7的holin蛋白含有一个跨膜区,属于Phage-holin-T家族;在E.coli BL21表达的重组holin蛋白以可溶性形式存在.表达菌E.coli BL21浊度测定试验结果表明holin蛋白的表达在4h内能够显著抑制表达菌E.coli BL21的增殖,活菌数减少,菌体出现凝集现象.研究结果提示噬菌体Bp7的holin蛋白具有抑菌活性,这将为进一步研究穿孔素的抑菌机制奠定基础.

关键词：穿孔素、序列分析、克隆、表达、活性分析

所属期刊栏目：48

分类号：S852.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31600149;山东省自然科学基金ZR2015CM020

在线出版日期：2018-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2392-2398