猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响

摘要：

旨在探究在H2O2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用.将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组.采用MTT法分别选取试验用的H2O2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内活性氧簇(ROS)的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氢酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白ZO-1基因的转录水平.结果显示,(1)构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H2O2浓度为0.4mmol·L-1.(2)H2O2能够极显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时极显著地降低了SOD和CAT的活力,极显著地升高MDA含量与LDH释放率.但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量极显著地降低(P＜0.01);同时极显著地提高了SOD和CAT的活力(P＜0.01),极显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P＜0.01).(3)实时荧光定量PCR结果显示,H2O2能够极显著地降低ZO-1基因的转录量(P＜0.01),与模型组比较,HEPs能够极显著的提高ZO-1基因的转录量(P＜0.01);Western blot结果显示ZO-1蛋白的表达量与ZO-1基因类似.可见,猴头菇多糖对H2O2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用.

关键词：猴头菇多糖、过氧化氢、IPEC-J2细胞、氧化应激、ZO-1

所属期刊栏目：48

分类号：S856.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31502110

在线出版日期：2017-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1769-1776