猪肿瘤坏死因子受体相关因子6的克隆、表达及对伪狂犬病病毒的抑制效应

摘要：

肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)是天然免疫信号通路中重要的接头分子,笔者旨在探索猪TRAF6的抗病毒和免疫调控功能.首先利用RT-PCR从猪外周血单核细胞克隆该基因,并进行序列比对分析;其次利用Piggybac转座子系统建立猪TRAF6稳定表达的PK-15细胞系;最后在细胞水平检测猪TRAF6对伪狂犬病病毒复制的影响以及对猪IFN-β等启动子活性的影响.结果显示,猪TRAF6基因为1 623 bp;将猪TRAF6基因连接到Piggybac转座子质粒成功构建真核表达载体PB-TRAF6,然后将重组质粒转染PK-15细胞,经药物处理和荧光筛选获得稳定表达TRAF6的细胞系;通过荧光定量PCR和Western blot确定稳定细胞系TRAF6的高效表达;体外抗病毒试验表明,TRAF6稳定细胞系能够显著抑制伪狂犬病病毒的复制;双荧光报告基因法检测发现,TRAF6可以促进poly(I:C)诱导的Ⅰ型干扰素应答.结果提示猪TRAF6具有显著的抗病毒和免疫调节功能,为研究TRAF6的免疫学功能奠定基础.

关键词：猪、肿瘤坏死因子受体相关因子6、Ⅰ型干扰素、伪狂犬病病毒、抗病毒活性

所属期刊栏目：48

分类号：S858.285.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31602033;河南省高校科技创新团队支持计划14IRTSTHN015

在线出版日期：2017-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：289-296